La Histotecnología en la Investigación Científica. Mas allá de las limitaciones...

La Histotecnología, es una herramienta fundamental, dentro del desarrollo de los proyectos de investigación, producto de que su aplicación, permite la visualización a través de la microscopia de luz o microscopia electrónica, de los distintos tejidos animales que han sido inoculados previamente con determinados compuestos químicos, con cierto tipo de microorganismos, expuestos a determinadas condiciones ambientales, o en su defectos que han sido modificados genéticamente, que conforme el tiempo avanza, afectan la morfología celular, y en consonancia la estructura histológica, producto de un cambio en la bioquímica, y por consiguiente en la fisiología del organismo del animal en estudio, generando como consecuencia un cambio histopatológico, o en su defecto un cambio positivo, en la inhibición o regresión, de una determinada condición patológica, permitiendo corroborar, comprobar, entender y comprender determinadas respuestas y la evolución de determinadas enfermedades, bajo ciertas circunstancias controladas. En ese sentido, nuestro trabajo, es generar el material biológico de carácter histológico necesario, apoyado en determinadas técnicas histoquímicas y de carácter inmunológico, necesarias, para desarrollar esas pruebas y obtener resultados satisfactorios que permitan avanzar en las diversas investigaciones científicas.

Pensamiento multidimensional

En este sentido, la Histotecnologia ha de ser una profesión que no puede limitarse a cumplir única y exclusivamente estándares clínicos, en donde, la rutina repetitiva que ya tiene un lineamiento especifico que seguir, podría generar cierta comodidad en la necesidad de crear nuevos y más eficientes procesos, por ello, esta debe ir apoyada de la mano de la investigación científica, la cual ha de brindar la posibilidad de que el conocimiento pueda evolucionar, permitiéndote desarrollar no un pensamiento lineal sino multidimensional, en aras de que necesitas comprender muchos procesos distintos a los que normalmente estás acostumbrado a desarrollar, para llevar a cabo de la forma más eficiente y eficaz, apoyado en el ensayo y error, nuevos objetivos que permitan cumplir con hipótesis planteadas por ti mismo como investigador en el procesamiento histológico en sí mismo, que en un futuro puedan formar parte de los procesos de carácter clínico, pues de la investigación ha de ser de donde los procesos que habitualmente estás acostumbrado a desarrollar, derivaron. Y que además podamos contribuir, en las diversas líneas de investigación que se puedan generar de otros investigadores, colocando a la histotecnología como herramienta, para su desarrollo parcial, o total.

Nadie puede limitar nuestra sed por aprender

Esto, implica dejar momentáneamente la rutina acostumbrada a un lado, y diversificar el conocimiento en todas las áreas de procesamiento histológico que la histotecnología brinda para llevar a cabo el desarrollo de las investigaciones; donde, el tejido pueda estar in vivo, y amerite de estudios de coloración para determinar viabilidad celular entre otras prácticas, donde la fijación puede tener connotaciones diferentes, y el proceso de desarrollo de la misma sea distinto al habitual, donde la inclusión, pueda significar el uso de nuevos medios, que permitan observar con mayor claridad y precisión otras estructuras de interés, donde la microtomía tenga una diversidad bastante importante en función de los análisis que se desee hacer molecularmente hablando, donde la Hematoxilina & Eosina, no ha de ser suficiente para develar los misterios que diversas patologías encierran y la histoquímica e histoenzimologia han de ser dos factores cruciales a tener en cuenta que pueden llegar a permitir develarlos, y donde las técnicas de inmunohistoquimica, tienen un valor fundamental para determinar moléculas de interés, y hacer seguimiento a diversos fármacos, para develar su verdaderos blancos y efectos sobre órganos distintos al órgano diana, y por último, donde el tipo de microscopia puede cambiar en cuestiones de días, modificando de esta manera el desarrollo de la técnica histológica en función de ello.

Fisicoquímica

Pero, para desarrollarnos en este campo, no basta seguir protocolos, sino entender cómo podemos cambiarlos en función de nuestras necesidades, lo cual implica un conocimiento fisicoquímico a profundidad de porque están elaborados de esa manera, para entender cómo podemos sustituir los pasos, los reactivos, los tiempos, y determinar su mejoría, o su orientación definitiva. Es de carácter esencial, conocer la bioquímica de nuestro cuerpo, de los organismos diversos que habitan en nuestro mundo, pues los protocolos no solo van destinados al ser humano, sino también a insectos, y vegetales, lo cual implica, que nuestro abanico de posibilidades donde la técnica histológica tiene cabida se hace cada vez más grande, y por tanto, cada vez más complejo, pues no todos los procesos se han de realizar de la misma manera aun cuando a veces sí, bajo ligeras y ciertas modificaciones. La química de los procesos, es también fundamental conocerla, al

Bioquímica

menos a tal punto que nos permita, saber cómo influir en ella para mejorar los procesos, sustituyendo un reactivo por otro, y como recuperar los mismos, cuando aparentemente han perdido funcionabilidad, desarrollando aún más nuestra capacidad de reciclar y abaratar costos, manteniendo de igual manera la calidad como bandera. Además, poseer conocimientos básicos en la fisiología de los diversos organismos, y como pueden estos ser afectados histopatológicamente en función de determinadas patologías, nos ayuda a saber qué podemos esperar y donde podemos ubicar, diversas moléculas de interés.

¿Caerse o levantarse?

En ese sentido, investigar no ha de ser tarea fácil, puesto que no todo ha de salir como esperamos, distinto de lo que aplicamos rutinariamente hablando, que ya ha sido probado muchas veces y tiene poco margen de error. Lo cual implica que debemos estar preparados psicológicamente para caernos y volver a levantarnos, y en palabras más simples, volver a empezar. Se trata de ensayar una y otra vez, y enamorarnos del error, pues es lo que nos permitirá entender por qué no, y por qué si, en los determinados cambios que realicemos. En la investigación científica, tenemos que anotar todos los cambios, pues estos se convierten en variables, y las variables hay que entenderlas, porque de allí emergen la resolución de los problemas, y cuando no estamos llevando la cronología de la serie de eventos y cambios que hemos realizado no podemos saber a ciencia cierta cuál ha de ser el que funciona y cuál ha de ser el que no, en este sentido, los cambios deben ir acompañados de cuando se hicieron, de por qué se hicieron y de quien los hizo, pues estos datos, ayudan a comprender donde estamos parados cuando de intentar resolver problemas se trata. 

Inoculación experimental

Además de lo anteriormente nombrado, preparar soluciones, es algo fundamental, no todo ha de venir en kits A+B, lo cual implica que Ud. Debe conocer como diluir, como concentrar, dominar las unidades de concentración y saber convertir, todo ello, motivado a que un mal cálculo, en la preparación de una solución arruina todo un experimento, y se debe nombrar este aspecto, aun cuando parezca algo obvio que debemos conocer, porque muchas veces no se ha de dominar del todo como parece, y esto trae como consecuencia una mala praxis, al dar por sentado que se conoce a cabalidad. 

Animal de experimentación.

En ese orden de ideas se ha de recomendar siempre practicar. Por otra parte, la bioseguridad y bioética han de mantenerse siempre en cuenta cuando de investigaciones se refiere, puesto que has de trabajar directamente con los pacientes y no con las muestras ya fijadas, en este caso animales en la mayor parte de las veces, y ello implica que debes conocer como trabajar con animales infectados, las precauciones que ello implica, las muestras que tan contaminante pueden ser, como podemos descartar el material, como manipularlos, como anestesiarles, cual ha de ser el mejor método en función del animal, y de su peso, esto motivado a la extracción de una determinada necropsia, o si ha de sacrificarse cuál ha de ser el método más aconsejable en función del protocolo a desarrollar histológicamente.

Bioseguridad

Además conocer que tan dañinos pueden ser los reactivos implicados en el desarrollo de las técnicas, desde el punto de vista de la carcinogenesis, teratogenesis, su causticidad, irritabilidad, su volatilidad, inflamabilidad, compatibilidad química, para comprender como debemos utilizarlos y en función de ello que debemos evitar, para que no ocurra un accidente.

Anatomía Ratón.

La anatomía de los diversos organismo a analizar también es importante para entender dónde estamos parados cuando de tomar una muestra se trate, y que en efecto sea el órgano, o el tejido que queramos estudiar así como también lo márgenes de resección implicados en dicha toma. Y ello deriva en saber que orientación diagnostica le conferiremos a la hora de realizar la inclusión tisular, basado en nuestro conocimiento macroscópico-histológico de las estructuras en estudio, parte crucial para visualizar de manera correcta lo que se espera. Por otra parte, la relacion que puede llegar a tener la histotecnologia con la biologia molecular, permitiendonos trabajar con ADN a partir demuestras incluidas en parafina, son universos no explorados, que deben ser de conocimiento por parte de todos los histotecnologos, para entender cuan polifacetica puede ser nuestra carrera. Así mismo, es necesario comprender como analizar las imágenes histológicas desde el punto de vista cualicuantitavo para digerir de esa manera los datos observados y si estos tienen una implicación estadística en los resultados de nuestra investigación.

Pensamiento científico

Todo ello, implica un conocimiento todavía más profundo de los procesos que nos confiere un plus de versatilidad a la hora de desenvolvernos en el ámbito clínico, puesto que gracias a esas experiencias podrás saber cómo solventar los problemas, más allá de afirmar que “esto es lo que a mí me ha funcionado siempre, y por ello, lo he hecho así durante años” por qué cuando se han de afirmar este tipo de cosas, ha de ser por que ha sido un conocimiento que se generó de manera empírica que por funcionar no se ha cuestionado, lo cual nos hace permanecer ciegos ante la posibilidad de cambiar su funcionamiento en dado caso de que ya no llegase a dar el mismo resultado y llegase a perder su utilidad en un determinado momento. 

Microtomia

Por tanto la histotecnología, no es un técnica más, sino un pilar fundamental para investigar, tenemos en nuestras manos la posibilidad de mostrar la fotografía de un evento que acontece en un determinado organismos, diagnosticado de la mano de un médico patólogo, de un investigador, o por qué no, de nosotros mismos, con estudios de postgrado que nos capacite en determinar y sugerir lo que pueda estar ocurriendo, y nos de la formación como investigadores. Pues recordemos que la ciencia se ha desarrollado porque un cumulo de profesiones han conformado equipos multidisciplinarios, y en comunión han llegado a descubrir el porqué de las diversas patologías que hoy, con tanto dominio se manejan en el mundo entero, de manera tal de que no es solo una profesión la que se encarga de descubrir, sino todas aquellas que trabajan, en pro de ello, y la histotecnología no ha de ser la excepción. 

Generar un debate por la verdad

Para finalizar, en la Investigación nada puede darse por sentado, todo debe cuestionarse, pues siempre existirá tu verdad, mi verdad y la verdad verdadera, pero lo cierto es que para que la última se genere, las dos primeras verdades tendrán que haberse debatido previamente, y probado además. Así, en ese orden de ideas, les invito a no limitar su conocimiento, ni a dejar que les limiten. Uds. tienen el poder de llegar hasta donde Uds. lo permitan, pues nadie más puede frenar su sed por aprender, y por demostrar al mundo que nuestra profesión, sí que tiene importancia, sí que permite entender al ser humano, a los animales, a los vegetales, sí que permite desarrollar la ciencia en el mundo, y sí que permite que seamos, muchos más enamorados de la pasión por investigar.

Autor: Lcdo. Daniel Abrams

Redacción de contenido: Lcdo. Daniel Abrams